---温冰箱_离心管_离心机
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●打开水浴锅加热至37℃。
● 超净台上放好离心管离心管规格选用15ml的,细胞培养瓶,移液管,紫外灭菌至少20至30分钟,吹风5至10分钟除去臭氧。
● 37℃预热好要复苏细胞的培养液,也可以不用预热培养液,根据细胞情况选择。
●向离心管中加约5至10ml培养液,从液氮罐或-80℃中取出冻存细胞,立即将冻存管放入37℃水浴中并轻轻摇动,待融化后约2min即可立即将解冻的细胞转移至含培养液的离心管中,800-1000rpm下离心5min,弃上清,加适量完全培养液轻轻吹打重悬细胞后转移至细胞培养瓶中,轻晃使瓶底液体分散均匀,标好细胞名称、代数、复苏日期,显微镜下观察后放入37℃,5%co2培养箱中。一般贴壁细胞过夜即可贴壁,换液和传代时间根据不同细胞生长情况而定。
离心机的组成和离心的参数
离心机的主要元件是转头,它是高速离心时转动的部件。
转头可以被固定在离心机上,也可以是一个离心机使用多个转头,将它们装在称为主轴的部件上。
离心机转头通常还带有一个盖子,能紧紧拧上盖住,防止样品飞出来。
许多离心机会有一个制冷单元,它可以保持内部温度在离心时得到控制。
离心机上还有旋钮或按钮用以输入每次离心所需要的参数:
包括离心时间、温度、和离心快慢,它可以是以速度或以相对离心力为单位。
离心速度用rpm来计量,即每分钟的旋转次数。rpm值有时有误导性,因为造成颗粒从混合物中分离出来的不是离心的速度,而是作用在这些颗粒上的作用力。
这种作用力与离心机转头的半径相关,由于不同的离心机有不同的转头大小,这样在同一个rpm速度下,产生的作用力会有不同。